萊克多巴胺快速檢測試劑盒是我司的熱銷產(chǎn)品之一，上海古朵生物科技有限公司是集研制開發(fā)、銷售、fu務(wù)于一體的高新技術(shù)企業(yè),公司產(chǎn)品涉及臨床快速診斷試劑、食品安全檢測劑，du品快速檢測，動物疾病防疫檢測試劑，免疫診斷試劑、臨床血液學(xué)和體液學(xué)檢驗試劑、微生物檢驗試劑、分子生物學(xué)檢驗試劑、臨床生化試劑、有機(jī)試劑等眾多領(lǐng)域。

名稱：萊克多巴胺快速檢測試劑盒
供應(yīng)商：古朵生物
產(chǎn)地：國產(chǎn)|進(jìn)口
樣本： 豬、牛、羊等肌肉和肝臟組織，尿樣、血清、飼料等
適應(yīng)物種： 豬、牛、羊等肌肉和肝臟組織，尿樣、血清、飼料等
應(yīng)用： 藥物殘留檢測
檢測方法： 酶聯(lián)免疫法
檢測限： 0.1ppb/0.05ppb
產(chǎn)品規(guī)格：96T×1/盒
保質(zhì)期：12個月
儲藏：于2～8℃避光保存。

萊克多巴胺快速檢測試劑盒操作說明  1 原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的萊克多巴胺，試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的萊克多巴胺和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗萊克多巴胺抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含萊克多巴胺含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中萊克多巴胺的殘留量。

2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度：  0.05ppb(ng/ml)
2.2 檢測下限：
    尿液樣本  …………………………… 0.05ppb
組織（處理方法一）………………… 0.2ppb
肌肉樣本（處理方法二）…………… 0.05ppb
肝臟樣本（處理方法二）…………… 0.1ppb
飼料樣本………………………………0.5ppb
2.3 交叉反應(yīng)率：
萊克多巴胺  …………………………
多巴酚丁胺  ………………………… < 1%
克倫特羅    ………………………… <0.1%
沙丁胺醇    ………………………… <0.1%

3 試劑盒組成
酶標(biāo)板………………………………96孔/板
標(biāo)準(zhǔn)液（綠蓋）：0 ppb、0.05ppb、0.15ppb、 0.45ppb、 1.35ppb、 4.05ppb………各1ml    
高標(biāo)準(zhǔn)液（紅蓋）：100ppb………1ml
酶標(biāo)記物 (紅蓋)…………………………7ml
抗體工作液 (藍(lán)蓋)………………………10ml
底物液A (白蓋)…………………………7ml
底物液B(黑蓋) …………………………7ml
終止液(黃蓋) ……………………………7ml
20X濃縮洗滌液(透明蓋)………………40 ml
10X復(fù)溶液(黃蓋)…………………………50 ml
說明書 …………………………………1份

4 需要的器材和試劑
4.1 儀器：酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：單道20μl-200μl，100μl-1000μl、多道300μl
4.3 試劑：正己烷、乙腈、甲醇、無水硫酸鈉

5 溶液的配制
5.1 試驗前用去離子水將20X濃縮洗滌液稀釋成工作洗滌液。（19份離子水+1份20X濃縮洗滌液）
5.2 試驗前用去離子水將10X復(fù)溶液稀釋成工作復(fù)溶液。（9份離子水+1份10X復(fù)溶液）

6 樣本前處理方法
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結(jié)果。
6.1 尿樣本處理方法
直接取50μl清亮尿樣進(jìn)行測定（渾濁尿樣需要過濾或經(jīng)4000r/min離心5min，以得到清亮尿樣），暫不使用的樣本應(yīng)冷凍保存。
尿樣本稀釋倍數(shù)：1    檢測下限：0.05ppb
6.2 組織樣本處理方法一
    稱取均質(zhì)后的組織樣本2±0.05g ，加入6ml復(fù)溶液，充分振蕩2min，室溫4000r/min以上離心10min。取50μl上清液進(jìn)行分析。
樣本稀釋倍數(shù)：4    檢測下限：0.2ppb
6.3 組織樣本（肌肉和肝臟）處理方法二
稱取均質(zhì)后的組織樣本2±0.05g ，加入8ml乙腈溶液，充分振蕩2min，室溫4000r/min以上離心10min。取上清液5ml，在56℃條件下氮氣或空氣流吹至完全干燥；
6.3.1 肌肉樣本：加入1ml 復(fù)溶液混合振蕩30s，取50μl用于分析。
肌肉樣本稀釋倍數(shù)：1    檢測下限：0.05ppb
6.3.2 肝臟樣本：加入2ml正己烷振蕩溶解，再加入1ml 去離子水混合振蕩30s，室溫4000r/min以上離心5min，去除上層；取50μl下層與50μl復(fù)溶液混勻；取50μl用于分析。
肝樣本稀釋倍數(shù)：2    檢測下限：0.1ppb
6.4 飼料樣本
稱取均質(zhì)后的飼料樣品1.0±0.05g，加入10ml甲醇，再加入5g無水硫酸鈉，振蕩2min；室溫 4000r/min以上離心10min；
吸出離心后的上清液1ml，于56℃氮氣吹干，用1 ml復(fù)溶液溶解干燥的殘留物，再加入1mL正己烷混合30s；室溫4000r/min以上離心5min。
取50μl下層進(jìn)行分析。
樣本稀釋倍數(shù)：10    檢測下限：0.5ppb

7 酶聯(lián)免疫試驗步驟
    將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
7.1 編    號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
7.2 加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50μl/孔，再加入50μl /孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。
7.3 洗    滌：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
7.4 顯    色：每孔加入底物液A 50μl，再加底物液B 50μl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。
7.5 終    止：每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。
7.6 測吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應(yīng)終止反應(yīng)后在10分鐘內(nèi)完成。

8 結(jié)果分析
8.1 百分吸光率的計算
    標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以第1個標(biāo)準(zhǔn)（0ppb）的吸光度值，再乘以，即
 百分吸光度值（%）＝    A    ×
    A0    
A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
8.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計算
    以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ppb）的對數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)品的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度，乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實際濃度。
 

 
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋，未用完的微孔板需放入有干燥劑的密封袋中保存(包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月)。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶，使用時需恢復(fù)至室溫以完全溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號試劑組分不得混用。

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