48T/96T 人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒使用方法
產(chǎn)品名稱:48T/96T 人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒使用方法
產(chǎn)品型號:48T/96T
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48T/96T 人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒使用方法的詳細介紹
中文名:人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒
英文簡稱:Human carbo
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本
人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒使用方法組成:
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品(1600pg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
實驗原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被ELISA捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ELISA呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒使用方法 安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
5. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒使用方法 注意事項:
1,封閉中的蛋白會非特異性將ELISA板子中沒有結(jié)合包被物的位點封閉掉,這樣之后加入的抗原或者抗體就不會再和板子發(fā)生非特異性的結(jié)合.使ELISA的結(jié)果更加的準確品
2,固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
3,包被抗體的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定然后觀察陽性標本的OD值。
4,酶標記抗體工作濃度的選擇:先用直接ELISA法進行初步效價的滴定,然后再固定其它條件,后在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
5, ELISA試劑盒酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),如 TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。
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