48t/96t 人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱:48t/96t 人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒
產(chǎn)品型號:48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48t/96t 人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒
英文名:Human glutathione,GSH ELISA kit
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃低溫保存
特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
保質(zhì)期:六個月
應(yīng)用領(lǐng)域:ELISA試劑盒等產(chǎn)品滿足于生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物實驗需求,不用于臨床診斷。
實驗原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒價格 技術(shù)原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒價格 操作時需注意:
1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用人Opiorphin蛋白(OPI)ELISA試劑盒說明書嚴格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2.若不同批號ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應(yīng)時間的誤差,做大量標本時,一孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正常現(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響大,建議校對加樣器。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒價格 操作步驟:
1.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
3.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
4.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
5.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6.溫育:操作同3。
7.洗滌:操作同5。
8.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
9.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
10.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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