48t/96t 人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱:48t/96t 人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒
產(chǎn)品型號:48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48t/96t 人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷。
運輸方式:現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒操作步驟 使用中常見問題:
一、ELISA試驗中結果顯色淡、靈敏度品低的原因。
1、移液的樣品吸量不足,移液時抽吸、排放太快,移液嘴內壁掛液太多貨內壁不清潔,造成加樣量不準。
2、恒溫箱溫度不是37℃(或43℃),或多塊反應板重疊放置造成板孔內的實際溫度偏差,使抗原、抗體復合物形成過少。
3、保溫時間不足,抗原、抗體反應不完全
4、顯色劑加入量不足。
5、顯色液的A、B液比例不對。、
6、洗滌時沖擊力過大,洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數(shù)增加,導致已形成的抗原、抗體復合物洗脫。
7、底物反應的溫度不夠,時間不足。
8、試劑盒在運輸、保存期間放置的溫度太高、時間過長,造成抗原、抗體效價下降,酶的活力降低。
9、試劑盒已超出保存有效期,抗原、抗體效價下降,酶活力降低。
人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒操作步驟 操作步驟:
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒操作步驟 注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
人肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒操作步驟 問題解析:
1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。
2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理
3.洗板時容易造成誤差: 因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動
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