人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒操作步驟，特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。

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中文名：人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個(gè)月
特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。


ELISA試劑盒說(shuō)明：
1．試劑盒保存：-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí))；2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2．濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處，請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
4．剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。


人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒操作步驟 本試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，計(jì)算樣品濃度。


本試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯(lián)板(Assay plate )：一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard)：2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent)：1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)
8. 底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒操作步驟 而未提供的試劑和器材：
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等


人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒操作步驟 采集及保存：
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。


注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液或、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。


計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo))，OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo))，在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。


人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒操作步驟 注意事項(xiàng)：
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
7. 底物請(qǐng)避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。