雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱:雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
別名:雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA kit
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃低溫保存
有效期:6個月
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 組成:
1,30倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標試劑 6ml×1 瓶
2,酶標包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
3,顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
4,終止液 6ml×1 瓶; 8 標準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
5,標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
6,封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 本試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 本試劑盒液體類標本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5)組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 組織結(jié)構(gòu):
1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心28分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 操作注意事項:
1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
3.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
8.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
9.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
10.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
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