48t/96t 人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒使用說明
產(chǎn)品名稱:48t/96t 人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒使用說明
產(chǎn)品型號(hào):48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48t/96t 人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒使用說明的詳細(xì)介紹
中文名:人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒
別名:人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA Kit
貨號(hào):fk-m00165
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個(gè)月
銷售:量大從優(yōu)、質(zhì)量保證。
特點(diǎn):敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
常見ELISA試劑盒:白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉(zhuǎn)化生長因子、趨化因子、細(xì)胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子等等。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
(1)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測定中),ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒說明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒使用說明書性能優(yōu)點(diǎn):
1.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度:zui低檢測濃度小于10 pg/ml。
3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒作流程:
1. 豬激素敏感性脂肪酶(HSL)酶聯(lián)免疫分析試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒使用說明書注意事項(xiàng):
1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2.若不同批號(hào)ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),一孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5.加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響大,建議校對(duì)加樣器。
人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA檢測試劑盒組成:
1.30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ;
2.酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 ;
3.酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ;
4.樣品稀釋液 6ml×1 瓶 ;
5.顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ;
6.顯色劑B 液 6ml×1/瓶 ;
7.終止液 6ml×1 瓶;
8.標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶;
9.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶;
10.說明書 1 份;
11.封板膜 2 張;
12.密封袋 1 個(gè);
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