48t/96t 人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒性能特點
簡單介紹
48t/96t 人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒性能特點的詳細介紹
中文名:人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒
別名:人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA Kit
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
適用范圍:僅用于科研實驗,禁用于臨床。
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒性能特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
ELISA試劑盒的儲存及有效期:
1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
2. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒性能特點實驗方法技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA檢測試劑盒組成:
1:預包被板: 96T/48T
2:酶標記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標準品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒性能特點操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 (2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒樣本處理方式:
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,胃液、唾液的采集時間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
2、采集血清時,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br /> 3、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br /> 4、采集血漿時一般不加抗凝劑,采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br /> 5、不貼壁細胞(分泌性蛋白),將培養(yǎng)基和細胞轉移至10ml離心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml離心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作為標本進行檢測,如有需要可進行透析或純化處理。
人鋅轉運蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒部分相關產品如下:
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