48t/96t 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA 試劑盒
產(chǎn)品名稱:48t/96t 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA 試劑盒
產(chǎn)品型號:48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48t/96t 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA 試劑盒的詳細介紹
中文名:人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒
別名:人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA Kit
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
ELISA試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨供應(yīng)。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
產(chǎn)品用途:用于測定血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等。
原理:ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
ELISA試劑盒檢測類型:雙抗體夾心法測抗原、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體、競爭法測抗體、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體、ABS-ELISA法。
ELISA實驗原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP-標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色, 并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)蛋白呈正相關(guān)。
用酶標(biāo)儀在(450nm)波長下測定測定O.D.值(吸光度),計算樣品濃度。ELISA實驗原理: 用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP-標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色, 并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)蛋白呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在(450nm)波長下測定測定O.D.值(吸光度),計算樣品濃度。
ELISA試劑盒的儲存及有效期:
1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
2. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
注意:
試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在次實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA 試劑盒使用說明書操作步驟:
1,試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。
2,實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3,不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6,洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
8,嚴(yán)格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為主。
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒注意事項:
1.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
8.按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA檢測試劑盒液體類標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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